摘要:目的通過煙草煙霧凝集物(cigarette smoke condensate,CSC)慢性染毒永生化人支氣管上皮細胞BEAS-2B體外構建惡性轉(zhuǎn)化細胞模型,miRNA芯片技術篩選模型中差異表達的miRNAs,發(fā)現(xiàn)與惡性轉(zhuǎn)化相關的miRNAs,為進一步研究CSC誘導惡性轉(zhuǎn)化的作用機制提供實驗基礎。方法CCK-8檢測細胞存活率,確定CSC染毒終濃度。劃痕實驗、克隆形成實驗、MTT實驗及凋亡檢測評估細胞惡性轉(zhuǎn)化情況。MiRNAs芯片檢測BEAS-2B和CSC30組細胞,明確差異表達譜。表達下調(diào)的hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521進行RT-PCR驗證。結果CSC誘導的惡性轉(zhuǎn)化細胞遷移能力、克隆形成能力和增殖活力明顯增強,凋亡率明顯下降。相對于BEAS-2B組,CSC30組細胞中有78種miRANs差異表達,其中52種表達上調(diào),26種表達下調(diào)。RT-PCR驗證hsa-miR-2115-3p和hsa-miR-4521表達下調(diào)與芯片結果一致。結論CSC可誘導BEAS-2B細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化,采用miRNA芯片技術篩選到miRNA差異表達譜,其可能與CSC誘導惡行轉(zhuǎn)化的發(fā)生發(fā)展有關。
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