摘要：為制備兔出血癥病毒VP60單克隆抗體,利用HEK293T細胞瞬時表達VP60,免疫Balb/c小鼠,將小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融合,間接ELISA篩選獲得陽性克隆細胞株-5D11。利用血凝抑制(HI)、間接免疫熒光(IFA)和Westernblot等方法對5D11分泌的單克隆抗體活性進行鑒定,并對其識別區(qū)域進行了定位。結(jié)果顯示,5D11能抑制病毒凝集人“O”型紅細胞,與桿狀病毒表達的VP60蛋白發(fā)生特異性抗原抗體反應,且其識別VP60蛋白線性抗原表位,并定位于494aa-579aa區(qū)段。成功制備了抗VP60蛋白單克隆抗體,為開展病原學檢測、流行病學研究等奠定了基礎。