摘要:為防治豬流行性腹瀉病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),本文制備納米化抗PEDV單鏈抗體(singlechain fragment,scFv)并驗證其生物學特性。通過PCR方法擴增含有纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(cellulose binding domain,CBD)的單鏈抗體基因CBD-scFv,構(gòu)建抗PEDV的原核重組表達載體pET19b-CBD-scFv,鑒定正確后進行蛋白表達與鑒定。經(jīng)硫酸水解法制備納米纖維素(cellulose nanocrystal,CNC)后,將純化復(fù)性后的CBD-scFv蛋白與CNC孵育結(jié)合得到納米抗體CNC-CBD-scFv,通過SDS-PAGE和透射電鏡鑒定復(fù)合物的結(jié)合效果。SDS-PAGE與Westernblot結(jié)果表明抗體蛋白CBD-scFv正確表達;制備的納米纖維素粒度均達到納米材料級別;CNC與CBD-scFv結(jié)合后SDS-PAGE與透射電鏡結(jié)果說明CNC與CBD-scFv在室溫條件下可高效結(jié)合。本試驗在高效表達合成復(fù)合納米抗體材料的同時為PEDV的防治及應(yīng)用奠定了一定的試驗基礎(chǔ)。
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中國獸醫(yī)學報雜志, 月刊,本刊重視學術(shù)導向,堅持科學性、學術(shù)性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:研究論文_預(yù)防獸醫(yī)學、研究論文_人獸共患病、研究論文_基礎(chǔ)獸醫(yī)學、研究論文_動物科學、綜述等。于1981年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。